시료의 균질화 및 단백질 정량
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작성일 25-07-06 17:13
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實驗목적
1. 세포내 물질을 연구하기 위해 세포로부터 세포내 물질을 얻어내기 위해 조직이나 세포 의 구조를 파괴시키고 균질화 하는 작업이 필요하다.
시료의 균질화 및 단백질 정량에 대한 자료입니다. 이번 實驗에서는 초음파 파쇄기를 이용하여 시료를 균질화 하는 작업을 하도록 한다.
※ 주의 : 단백질 손상을 막기 위해 시료가 담긴 용기를 항상 얼음에 넣어서 사용할 것!
2. 초음파 파쇄기의 tip이 microtube의 세포 현탁액의 3/5 정도 깊이까지 잠기게 한다.
시약 및 기구1. 초음파 파쇄기(ultrasonicator) - 초음파를 발생시켜 용액 내의 물분자의 운동속도를 증가 시킴으로써 세포막에 충격을 줘 세포막을 와해시킨다.
2. 생화학적 分析(분석)은 시료내부의 생물학적인 구ingredient의 특징을 알아보는 것이다. 그중 정량 分析(분석)은 물질을 구성하는 양적관계를 조사하는 것이다.
6. Lowry C : 2% Sodium-potassium tartrate - Lowry B의 가 단백질에 잘 붙도 록 도와주는 역할
7. Folin`s reagent (2N) : for use, 1:1 dilute W/D·W -> 1N
8. 1 Bovine serum albumin (BSA) - 단백질 표준용액
9. 5 1회용 시험관(test tube)
10. 미세피펫(Micropipettes)
11. Tips
12. Cuvette
13. 분광광도계(Spectrophotometer)
14. Vortex
실…(drop)-시료의 균질화
1. 수확한 세포를 TMDEG(완충용액) 300에 넣고 vortex로 섞어준다.
☞ 얼음 때문에 잘 안 보일 수 있으므로 주의하고 tip의 위치와 눈의 위치를 맞춰서 보도
설명
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시료의 균질화 및 단백질 정량에 대한 자료(data)입니다. 이번 實驗에서는 색의 變化를 이 용하는 비색정량分析(분석) 중 Lowry법을 이용하여 단백질을 정량하여 보관한다. 단백질정량 , 시료의 균질화 및 단백질 정량공학기술레포트 ,
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단백질정량
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시료의 균질화 및 단백질 정량
다.
2. TMDEG : 완충용액(T : tris - 용액 자체 내 완충작용, M : , D : DTT - 환원제, E : EDTA - 이온을 잡아줌, G : glyce - 운동성에 대한 완충작용)
