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[생명과학실험] Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석

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작성일 23-05-24 01:14

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따라서 물질대사 산물로 인한 혈액의 pH變化(변화)를 막고 생체 내 항상성을 유지할 수 있도록 혈액은 하나의 완충용액이라고 할 수 있다아 특히, 생체 내 대부분의 효소는 매우 좁은 범위에서만 활성을 나타내므로 이 작용은 필수적이라 할 수 있다아 혈액에서 완충작용을 하는 물질로는 Hb(헤모글로빈)이나 phosphate 등이 있다아

Buffer solution

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[생명과학실험] Tris-HCl Buffer 만들기 - 단백질 분리정제 및 기능분석
주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석
　Buffer solutions는 적은 양의 산이나 염기를 첨가하거나 희석시킬 경우, 용액의 H+와 OH- 의 농도 變化(변화)를 줄이기 위해 사용하는 용액이다. 실험도구 : pH 미터기, Tris 가루, HCl, 증류수, 마그네틱 바, stirier, spatula, pipette (1ml), 메스실린더 (50ml이상), 비커, 전자저울, 비닐장갑, 기름종이, 50ml튜브

목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기
생명과학실험,Tris-HCl Buffer 만들기, 단백질 분리정제

설명
　만약 위의 용액에 염기를 첨가하면, 염기는 곧 산-염기 중화反應(반응)을 통해 H3O+를 제거하고, 평형反應(반응)에 의해 위의 反應(반응)은 정反應(반응)이 진행되어 원래의 pH를 유지하게 된다된다. 마찬가지로, 위 용액에 강산을 첨가하면, 짝염기 A−와 protonated 되어 역反應(반응)이 진행되므로 원래의 pH가 유지될 수 있다아 이러한 현상은 강산이나 강염기의 용액에 산 또는 염기를 떨어뜨렸을 때와 큰 차이를 보이는데, 이는 강산에 강염기를 이용해 titration 할 때보다 약산과 약염기를 titration할 때 pKa값 근처에서의 pH 變化(변화)가 작은 현상과 비슷하다.
　생체 내의 물질대사의 일종인 호흡과정에서는 이산화탄소가 생성되고, 이는 혈액에 녹아 산으로 작용하게 된다된다. 용액의 pH變化(변화)에 저항하는 buffer solutions의 기능은 앞서 말한 약산과 그 짝염기의 평형에 의한 결과로, Le Chatelier의 공통이온效果에 의해 설명(explanation)될 수 있다아

실험goal(목표) : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.순서
HA(aq) + H2O(l) → H3O+(aq) + A−(aq)

주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석 실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m. 목적 : Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기 실험목표 : 1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.
실험일시 : 2008년 3월 11일 2:00p.m.~ 4:30p.m.

Download : [생명과학실험] Tris-HCl Bu.doc( 76 )

실험도구 : pH 미터기, Tris 가루, HCl, 증류수, 마그네틱 바, stirier, spatula, pipette (1ml), 메스실린더 (50ml이상), 비커, 전자저울, 비닐장갑, 기름종이, 50ml튜브

다. Buffer solutions는 약산과 그것의 짝염기로 이루어진 것이 일반적이며, 약염기와 그것의 짝산으로 이루어진 경우는 전자보다 적다.

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